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高效液相色谱仪的使用方法及应用 来源：网络整理•作者：网络整理• 2020-11-12 16:48 • 次阅读 • 个评论 高效液相色谱仪的使用方法1、开机设定参数（检测波长、流速），更换所需流动相，检查色谱柱是否正确。
2、排液置换管路中流动相，冲洗进样阀，洗好进样针。
3、冲洗色谱柱进行平衡，其间可提前进行样品的处理，样品信息的注册。
4、平衡好以后进空白试验，排除系统污染。
5、柱子稳定好以后进样，等待运行结束（其间清洗进样针），积分计算，出具报告。 详细操作步骤如下： 1、 开机操作： （1）、打开电源，用Harb相连接时，注意Harb电源，打开计算机，打开Bootp Server（一般启动时已打开）； （2）、自上而下打开个组件电源，Bootp Server里显示有信号时（有六行字符），打开工作站（先打开On line）； （3）、打开冲洗泵头的10％异丙醇溶液的开关（需用针捅抽），控制流量大小，以能流出的最小流量为准； （4）、注意各流动相所剩溶液的容积设定，若设定的容积低于最低限会自动停泵，注意洗泵溶液的体积，及时加液； （5）、使用过程中要经常观察仪器工作状态，及时正确处理各种突发事件。 2、 先以所用流动相冲洗系统一定时间（如所用流动相为含盐流动相，必须先用水冲洗20分钟以上再换上含盐流动相），正式进样分析前30min 左右开启D灯或W灯，以延长灯的使用寿命； 3、 建立色谱操作方法，注意保存为自己命名的Method，勿覆盖或删除他人的方法及实验结果； 4、 使用手动进样器进样时，在进样前和进样后都需用洗针液洗净进样针筒，洗针液一般选择与样品液一致的溶剂，进样前必须用样品液清洗进样针筒3遍以上，并排除针筒中的气泡； 5、 溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎，在更换流动相时注意保护，当发现过滤头变脏或长菌时，不可用超声洗涤，可用5%稀硝酸溶液浸泡后再洗涤； 6、 实验结束后，一般先用水或低浓度甲醇水溶液冲洗整个管路30分钟以上，再用甲醇冲洗。冲洗过程中关闭D灯、W灯； 7、 关机时，先关闭泵、检测器等，再关闭工作站，然后关机，最后自下而上关闭色谱仪各组件，关闭洗泵溶液的开关； 8、 使用者须认真履行仪器使用登记制度，不要擅自拆卸仪器。 流动相： 1、 流动相应选用色谱纯试剂、高纯水或双蒸水，酸碱液及缓冲液需经过滤后使用，过滤时注意区分水系膜和油系膜的使用范围； 2、 水相流动相需经常更换（一般不超过2天），防止长菌变质； 3、 使用双泵时，A、B、C、D四相中，若所用流动相中有含盐流动相，则A、D（进液口位于混合器下方）放置含盐流动相，B、C（进液口位于混合器上方）放置不含盐流动相； A、B、C、D四个储液器中其中一个为棕色瓶，用于存放水相流动相。 样品： 1、 采用过滤或离心方法处理样品，确保样品中不含固体颗粒； 2、 用流动相或比流动相弱（若为反相柱，则极性比流动相大；若为正相柱，则极性比流动相小）的溶剂制备样品溶液，尽量用流动相制备样品液； 手动进样时，进样量尽量小，使用定量管定量时，进样体积应为定量管的3～5倍； 色谱柱： 1、 使用前仔细阅读色谱柱附带的说明书，注意适用范围，如pH值范围、流动相类型等； 2、 使用符合要求的流动相； 3、 使用保护柱； 4、 如所用流动相为含盐流动相，反相色谱柱使用后，先用水或低浓度甲醇水（如5％甲醇水溶液），再用甲醇冲洗。 5、 色谱柱在不使用时，应用甲醇冲洗，取下后紧密封闭两端保存； 6、 不要高压冲洗柱子； 7、 不要在高温下长时间使用硅胶键合相色谱柱； 高效液相色谱仪的特点 高压——压力可达150～300 kg/cm2。色谱柱每米降压为75 kg/cm2以上。 高速——流速为0.1～10.0 mL/min。 高效——塔板数可达5000/米。在一根柱中同时分离成份可达100种。 高灵敏度——紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。 HPLC与经典液相色谱相比有以下优点： 速度快——通常分析一个样品在15～30 min，有些样品甚至在5 min内即可完成。 分辨率高——可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果。 灵敏度高——紫外检测器可达0.01ng，荧光和电化学检测器可达0.1pg。 色谱柱可反复使用——用一根色谱柱可分离不同的化合物。 样品量少，容易回收——样品经过色谱柱后不被破坏，可以收集单一组分或做制备。 高效液相色谱仪的应用 高效液相色谱法只要求样品能制成溶液，不受样品挥发性的限制，流动相可选择的范围宽，固定相的种类繁多，因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。 与试样预处理技术相配合，HPLC 所达到的高分辨率和高灵敏度，使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能，能够分离复杂相体中的微量成分。随着固定相的发展，有可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离。 HPLC成为解决生化分析问题最有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用，流出组分易收集等优点，因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。高效液相色谱仪与结构仪器的联用是一个重要的发展方向。 液相色谱- 质谱联用技术受到普遍重视，如分析氨基甲酸酯农药和多核芳烃等； 液相色谱- 红外光谱联用也发展很快，如在环境污染分析测定水中的烃类，海水中的不挥发烃类，使环境污染分析得到新的发展。责任编辑：YYX
岛津Prominence UFLC XR超快速液相色谱仪介绍岛津公司2008年全新推出的Prominence UFLCXR超快速高分离液相色谱仪，是以高分析精度和可靠性为基础，兼备超快速分析和超高效分离的液相色谱仪。2022-04-08 09:44:4953排查气相色谱分析仪故障的思路分享气相色谱仪是一种多组份混合物的分离、分析工具，它是以气体为流动相，采用冲洗法的柱色谱技术。当自动制样进样装置将多组份的分析物质推入到色谱柱时，由于各组分在色谱柱中的气相和固定液液相间的分配系数不同2022-04-06 17:08:17395安捷伦加大对上海制造中心的投资力度_戴姆勒采用西门子Xcelerator塑造二氧化碳中和车辆日前，安捷伦科技公司（纽约证交所：A）宣布将扩大上海制造中心的生产及能力。公司将加大投资力度，扩大液相色谱仪（LC）、光谱仪及质谱仪（MS）系统等先进技术产品的生产规模，进一步提高安捷伦在中国国内的制造能力，以满足日益增长的客户需求。2022-03-15 11:13:21464如何生成真实的液相色谱分析结果中生成有效数据的关键。 液相色谱法，是从事制药、食品、法医学、聚合物、生命科学和环境研究的实验室中应用广泛的技术。数以千计的高效液相色谱仪在全球制药行业的研发和质量控制实验室工作，每天都会产生大量数据，这有助2022-01-21 10:37:5669如何分析高效液相色谱图？高效液相色谱法中，对色谱图分析是很重要的。你可以将色谱图看成一个横纵坐标为时间与数据的二维图。固定相则是像海绵一样的柱子，里面很多孔洞让样品流动，由于每个样品物质的吸附能力不同，在色谱图中会有不同2021-12-11 09:09:531596PICC安装及使用方法汇总PICC安装及使用方法汇总2021-10-18 16:46:523农残检测仪的使用方法是什么农残检测仪的使用方法，农产品是农业经济发展的关键，现在因为农药残留问题，致使部分农产品生产不合标，农残检测仪【恒美HM-NC20】的使用可以检测农产品农药残留含量，规范农药使用，为人们的健康做好服务。2021-10-08 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14:06:03151305液相色谱仪对抗体的实验分析本文详细介绍了液相色谱仪分析抗体的实验解析。2017-11-10 09:56:021液相色谱仪相关实用技术综合整理不同公司的色谱柱接头不同。处理不当时，会造成： ✎ 色谱峰展宽（死体积）致使柱效下降或渗漏 ❀ 解决办法∶ ✎ 自制相应的转换接头 ✎ 使用通用型接头（锥箍及螺母） ➠ 这种锥箍在不锈钢管上是活动2017-11-08 19:06:553高效液相仪色谱仪常用检测器的详细介绍，UVD） 紫外可见吸收检测器（UVD）是 HPLC 中应用最广泛的检测器之一，几乎所有的液相色谱仪都配有这种检测器。其特点是灵敏度较高，线性范围宽，噪声低，适用于梯度洗脱，对强吸收物质检测限可达 1ng，检测后不破坏样品，可用于制备，并能与任何检测器串联使用。紫外2017-11-06 14:12:1613DID色谱仪的原理、特性及其设计与应用的介绍serics100DID氦离子气相色谱仪的检测器原理： 放电离子化检测器的结构如图6所示。该检测器由电离室和放电室两部分组成，两室之间有狭路相通。当在放电室内的两个高压电极上加以适量高压电后，两电极2017-11-03 14:11:3516反相HPLC色谱柱的再生步骤及其保养介绍反相HPLC色谱柱的推荐再生步骤 1.取下色谱柱，然后重新连接到色谱仪上，让液体/气体反方向流过色谱柱。 2.用HPLC级水冲洗掉盐/缓冲液。以1毫升/分钟的速度把25毫升水泵入色谱柱。 3.用252017-11-03 11:08:434气相色谱仪控制核心与M32F101VB外围电路的设计气相色谱仪控制核心主要有单片机、DSP和ARM芯片组成。其中单片机的数据运算能力较弱;DSP（Digital Singnal Processor）是一种独特的微处理器，具有强大的数据处理能力和高运行2017-10-20 10:19:2121气相色谱仪应用方案1 主要内容 1.1课题的目的及意义 气相色谱仪是一个精密仪器，其用途非常广泛。他广泛用于石油、化工、农药、公安、白酒、环境检测、卫生防疫以及高等院校、科研部门。自1952年世界上第一次创建实用气液2017-10-16 11:00:541气相色谱仪应用方案1 主要内容 1.1课题的目的及意义 气相色谱仪是一个精密仪器，其用途非常广泛。他广泛用于石油、化工、农药、公安、白酒、环境检测、卫生防疫以及高等院校、科研部门。自1952年世界上第一次创建实用气液2017-10-16 11:01:4416液相色谱仪的介绍及其应用液相色谱仪作为传统的高科技产业，国外品牌在技术与产品应用方法上已经形成了比较系统的经验。这一现状直接导致国内液相色谱仪器市场出现了天平的压倒式倾斜。外国液相色谱品牌在国内的政府采购、招标市场几乎占据2017-09-15 14:47:2310分析气相色谱仪使用气体纯度和选择原则分析气相色谱仪使用气体纯度和选择原则2017-01-22 21:49:0010抗肿瘤药物及其代谢物LC-MS/MS检测方案目前处于新药研发过程中，化合物名称和结构属于保密阶段。方案中使用岛津超高效液相色谱仪LC-30A和三重四极杆质谱仪LCMS-8030联用快速测定抗肿瘤药物HD和HD-M，给出了线性范围、重复2012-03-29 11:39:061357工业色谱仪仿真系统模拟出峰的数据处理详细介绍色谱仪数据分析的理论依据,以及在PC上模拟实现输出谱峰,并根据模拟出峰给出峰形分割和组分浓度的定量计算以及柱效评价的实现方法.2011-08-30 18:01:0449高效逆流色谱仪HPCCC常见问题解答HPCCC是一种独特的技术，可以在低压状况下实现高质量的色谱纯化分离，并且进样量大，溶剂使用量低。 在化学纯化技术方面存在着许多挑战;但是HPCCC特别适用于下列情况： 样品的溶解2011-07-05 16:59:2526自动驾驶仪MP2000的原理及使用方法介绍了自动驾驶仪MP2000的原理及使用方法。并讨论了其在飞行控制系统中的应用与控制作用。2011-01-14 10:08:2977安捷伦气相色谱仪应用程序 安捷伦科技公司(纽约证交所：A)今日宣布，用户现在可以从 App Store 气相色谱计算器应用程序。气相色谱计算器2010-10-21 09:26:011110气相色谱仪检定规程色谱仪检定规程气相色谱仪在石油、化工、生物化学、医药卫生、食品工业、环保等方面应用很广。它除用于定量和定性分析外，还能测定样品在固定相上的分配系数、活2010-09-14 16:48:1625高效液相色谱仪的研制与技术开发详细介绍了 EChrom98 色谱数据处理系统设计过程 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